Оценка и анализ качества гемопоэтических стволовых клеток использованием проточной цитометрии

Что такое гемопоэтические стволовые клетки? Слово «гемопоэтический», переведенное с древнегреческого, означает «образующий кровь». Проще говоря, это клетки, из которых в течении жизни человека, во всем организме образуются клетки крови - лимфоциты, так называемые белые кровяные тельца, которые обеспечивают защиту организма против инфекций; эритроциты (красные кровяные тельца), которые снабжают организм кислородом; тромбоциты, которые обеспечивают свертывание крови, макрофаги, гранулоциты и т. д. Кровеобразующие стволовые клетки могут быть получены, например, из костного мозга, пуповинной крови, мобилизованной периферической крови.

Поиски стволовых клеток начались со времен бомбардировки Хиросимы и Нагасаки в 1945 году. У людей, которые подверглись воздействию малых доз радиации и умерали в течение длительного периода времени, был ослабленный гемопоэз (кроветворение), который не смог восстановить необходимое количество белых кровяных телец, в результате чего люди умирали от обычных инфекций, или же организм был не в состоянии создать достаточное количество тромбоцитов и у людей было нарушено свертывание крови, в результате чего даже незначительная травма стала фатальной. 

Позднее было показано, что при облучении всего организма животных наблюдаются подобные симптомы, но защищая от излучения всего лишь одну кость в организме или селезенку (орган кровеносной и лимфатической системы), было предотвращено возникновение синдрома радиации. Эти факты показывают огромное значение гемопоэтических стволовых клеток в обеспечивании ежедневных функций живого организма.

Содержание гемопоэтических стволовых клеток в крови довольно низкое. Эти клетки составляет от 0,1% до 0,8% от всех клеток крови, не учитывая эритроцитов и тромбоцитов. Поэтому очень важно определить качество изолированного препарата гемопоэтических стволовых клеток, выявить их количество в продукте и охарактеризовать их жизнеспособность. Эти показатели существенны для правильного расчета терапевтической дозы и, следовательно, эффективности трансплантации.

Центр стволовых клеток iVF Riga осуществляет сбор пуповинной крови и ее крио презервацию. Для хранения подготовленный продукт анализируется с помощью современного и эффективного метода - проточной цитометрии (в буквальном переводе это означает - измерение клеток в протоке) на аппарате FACS. FACS (на английском языке: fluorescence activated cell sorting) является флуоресценцией активированная сортировка клеток. В основе метода лежит обработка препарата крови специальными антителами, которые связанны с флуоресцентной краской, и могут «поймать» именно нам необходимые гемопоэтические стволовые клетки во всей смеси клеток.

Используя дополнительные красители, можно различить живые и неживые клетки. Анализ предусматривает определение CD34 и CD45 антигенов и жизнеспособности клеток. CD34 антиген находится только на гемопоэтических стволовых клетках, в свою очередь, CD45 антиген находится на всех лейкоцитах. Определение CD34 и CD45 антигенов на поверхности стволовых клеток позволяет различить стволовые клетки, происходящие из крови, от стволовых клеток, которые произошли из других видов тканей. Этот метод является чувствительным, но требует определенных знаний и опыта. 

В Центре стволовых клеток iVF Riga имеется ряд квалифицированных лабораторных специалистов, которые способны качественно производить данный анализ. Кроме того, центр ввел строгий контроль качества- результаты анализов и расчетов проверяются несколько раз, и это минимизирует потенциальный допуск ошибки лаборанта. Проточная цитометрия является общепризнанным и широко используемым методом определения качества и подсчета гемопоэтических стволовых клеток во всем мире. На основе данных проточной цитометрии Центр стволовых клеток iVF Riga выдает пациенту сертификат, подтверждающий качество полученного образца пуповинной крови.

Дополнительная информация об использовании проточной цитометрии в исследованиях стволовых клеток  здесь